、毛は国民党の宣伝主任代行となった。

1927年の早期に、毛は緊急会議が開催された湖南へ戻り、蒋介石による北伐に続く農民による暴動の調査に基づく報告書を作成した。これは毛の革命理論の応用の成功に対する最初の決定的な段階と考えられている<ref name="peasant"></ref>。

コミンテルンの指導に従って国共合作に重要な役割を果たすが、1927年の上海クーデターで国共合作が崩壊すると、毛沢東は江西省で蜂起（秋収起義）するも失敗、配下の農民兵とともに孤立し、家族とも離れて湖南省と江西省の境にある井崗山に立てこもることになった。この根拠地に潜伏中に賀子珍と関係を持ち、1929年には長女が誕生している。同年、毛沢東は井崗山を去り、江西ソヴィエトを建設。主席となるが、以後四年間国民党軍の執拗な攻撃にさらされた。